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人低密度脂蛋白受体相关蛋白1B(LRP1B)ELISA试剂盒说明书
BS-0572-HA 人低密度脂蛋白受体相关蛋白1B(LRP1B)ELISA试剂盒
以下是关于天津本生人低密度脂蛋白受体相关蛋白1B(LRP1B)ELISA试剂盒的标准化操作说明:
一、检测原理
采用双抗体夹心ELISA法,将抗LRP1B抗体预包被于酶标板,通过抗原-抗体-HRP酶复合物与TMB底物显色反应进行定量检测。
二、试剂盒组成
典型配置包含(不同厂商可能差异):
预包被96孔板(可拆卸)
LRP1B标准品(冻干粉,含稀释液)
HRP标记检测抗体
20×浓缩洗涤液
TMB显色底物(A/B液需等体积混合)
终止液(2M硫酸)
三、样本处理要求
适用样本:
血清:3000rpm离心10分钟分离
血浆:需EDTA/肝素抗凝
细胞上清液:去除沉淀后检测
保存条件:
短期(1周内):2-8℃
长期:-20℃分装,避免反复冻融
四、标准曲线制备
标准品通常需梯度稀释至以下浓度范围:
基础浓度:10,000pg/mL原液
工作浓度:78-5,000pg/mL(7个梯度+空白)
五、操作流程
加样:
每孔加入100μL标准品/样本
37℃孵育90分钟
洗涤:
手工洗板:注满洗涤液静置1分钟,重复5次
酶标抗体:
加HRP标记抗体100μL,37℃孵育60分钟
显色:
加TMB底物避光反应15-30分钟
终止与检测:
加终止液后立即用450nm酶标仪读数
六、结果计算
以标准品OD值绘制四参数对数曲线
样本浓度需乘以稀释倍数
七、注意事项
质量控制:
建议CV值控制:批内<10%,批间<12%
每板需设复孔和空白对照
干扰规避:
溶血/脂血样本需预处理
避免金属离子污染显色系统
储存条件:
未开封试剂盒:2-8℃保存
开封后酶标板需密封防潮
(注:具体参数请以实际试剂盒说明书为准,不同品牌可能存在差异,以上资料仅供参考,具体请咨询技术老师或供应商)。
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